Jak działa laserowy skaningowy mikroskop konfokalny?
Jak działa laserowy skaningowy mikroskop konfokalny?
Anonim

CLSM Pracuje przechodząc laser wiązka przez aperturę źródła światła, która jest następnie skupiana przez soczewkę obiektywu na małym obszarze na powierzchni próbki, a obraz jest budowany piksel po pikselu poprzez zbieranie wyemitowanych fotonów z fluoroforów w próbce.

A zatem, jak działa mikroskop konfokalny?

Mikroskopy konfokalne działają na zasadzie wzbudzenia punktowego w próbce (plamka o ograniczonej dyfrakcji) i punktowa detekcja uzyskanego sygnału fluorescencyjnego. Otwór w detektorze stanowi fizyczną barierę, która blokuje nieostrą fluorescencję.

Po drugie, jakie jest powiększenie laserowego skaningowego mikroskopu konfokalnego? Ten instrument pierwszej generacji obrazuje struktury rogówki w ×400 powiększenie i ma pole widzenia 400 × 400 µm, gdy jest używany z obiektywem ×63 o aperturze numerycznej 0,9. Wykorzystuje diodę helowo-neonową o długości fali 670 nm; laser jako źródło światła.

Wiedz też, co obserwują laserowe mikroskopy konfokalne?

Konfokalna laserowa mikroskopia skaningowa (CLSM) umożliwia optyczne cięcie przez tkankę. Eliminując nieostre obrazy, CLSM zapewnia większą rozdzielczość przestrzenną w żywej tkance i umożliwia wizualizację żywych struktur tak małych jak kolce dendrytyczne (ryc. 18.7).

Jaka jest maksymalna rozdzielczość laserowego skaningowego mikroskopu konfokalnego?

W praktyce maksymalna rozdzielczość w Z (osiowe), które można zrealizować w a mikroskop konfokalny system wynosi około 0,8 µm; 2-3x gorzej niż w wymiarze xy.

Zalecana: