Dlaczego membrana nitrocelulozowa jest używana w Southern blotting?
Dlaczego membrana nitrocelulozowa jest używana w Southern blotting?

Wideo: Dlaczego membrana nitrocelulozowa jest używana w Southern blotting?

Wideo: Dlaczego membrana nitrocelulozowa jest używana w Southern blotting?
Wideo: Quick Tips: Considerations for Selecting Nitrocellulose or PVDF to use for Western Blots 2024, Listopad
Anonim

W oryginalnym protokole membrana nitrocelulozowa byli używany dla kleić w przypadku południowa plama ale ostatnimi czasy nylon membrany zostały wdrożone dla kleić proces ze względu na ich zdolność do wydajnego wiązania większej ilości DNA, co pozwala na południowa plama do przeprowadzenia przy mniejszej ilości

W związku z tym, dlaczego w blottingu stosuje się membranę nitrocelulozową?

Membrany nitrocelulozowe są popularną matrycą używany w białku kleić ze względu na ich wysokie powinowactwo do wiązania białek, zgodność z różnymi metodami wykrywania (chemiluminescencja, chromogenność i fluorescencja) oraz zdolność do immobilizacji białek, glikoprotein lub kwasów nukleinowych.

Dlaczego DNA jest przenoszone na nylonową membranę? Używając 0,4 M NaOH jako przenosić rozpuszczalnik po krótkiej obróbce wstępnej żelu w kwasie, DNA jest depurynowany podczas przenosić . Narażenie na DNA na światło ultrafioletowe, w żelu lub po przenosić do nylonowa membrana , zmniejsza jego zdolność do hybrydyzacji.

Dodatkowo, jaki jest cel Southern blotting?

A południowa plama to metoda stosowana w biologii molekularnej do wykrywania określonej sekwencji DNA w próbkach DNA. Southern blotting łączy przeniesienie fragmentów DNA oddzielonych elektroforetycznie na filtr membranowy, a następnie wykrywanie fragmentów przez hybrydyzację sondy.

W jaki sposób Southern blot pomaga w badaniach sądowych?

A południowa plama , nazwany na cześć jego wynalazcy Edwin Południowy , to metoda stosowana do sprawdzania obecności określonej sekwencji DNA w próbce DNA. Gdy DNA osobnika zostanie strawione określonym enzymem restrykcyjnym, powstałe fragmenty są analizowane przez: południowa plama analiza.

Zalecana: