Spisu treści:

Jak załadować próbkę w chromatografii kolumnowej?
Jak załadować próbkę w chromatografii kolumnowej?

Wideo: Jak załadować próbkę w chromatografii kolumnowej?

Wideo: Jak załadować próbkę w chromatografii kolumnowej?
Wideo: Loading a Sample on a Column Chromatography 2024, Marsz
Anonim

Aby załadować kolumnę:

  1. Rozpuść próbka w minimalnej ilości rozpuszczalnika (5-10 kropli).
  2. Za pomocą pipety lub strzykawki z grubą igłą wkropl próbka bezpośrednio na wierzch krzemionki.
  3. Raz cały próbka został dodany, zezwól kolumna spuścić tak, aby poziom rozpuszczalnika dotykał górnej części krzemionki.

W związku z tym, ile krzemionki używasz w kolumnie?

Dobry zakres to 100/20 do 100/10 (5 do 10 mL) eluentu na 100g krzemionka . To nie jest dobry pomysł posługiwać się inny rozpuszczalnik tutaj - rozdział zostanie poważnie zagrożony.

Po drugie, jak działa chromatografia kolumnowa flash? Chromatografia błyskowa . Cienka warstwa chromatografia służy do monitorowania reakcji, sprawdzania czystości związków i optymalizacji mieszanin rozpuszczalników pod kątem chromatografia kolumnowa . Jest to mikrotechnika, która wymaga bardzo małych ilości mieszanki.

W związku z tym, dlaczego ważne jest, aby nie dopuścić do wyschnięcia fazy stacjonarnej podczas pracy kolumny?

Innymi słowy, gnojowica wewnątrz kolumna nigdy nie powinno być dozwolone wysuszyć . Jeśli tak się stanie, może to spowodować pęknięcia i nierówności w bryle faza , co zmniejszy skuteczność separacji. Próbkę do oddzielenia wprowadza się do roztworu w odpowiednim rozpuszczalniku, najlepiej możliwie jak najbardziej stężonym.

Co się stanie, jeśli kolumna wyschnie?

Gdyby pozwoliłeś kolumna wyschła krzemionka zacznie pękać i uzyskasz słabą separację związków. Jak ty biegać ten kolumna , nigdy nie pozwól, aby poziom rozpuszczalnika spadł poniżej poziomu żelu krzemionkowego, w przeciwnym razie uzyskasz słabe wyniki.

Zalecana: